waters液相色譜儀是屬于易學(xué)難用的儀器,特別講究“正確使用”和經(jīng)驗(yàn)。液相工作者接觸的是流動(dòng)相,也就是流動(dòng)相,是造成液相色譜各種問(wèn)題的主要源頭。waters液相色譜儀一直以來(lái)就備受廣大實(shí)驗(yàn)室愛(ài)好者的寵愛(ài),操作簡(jiǎn)單、、結(jié)果。在此給您介紹部分waters液相色譜儀常見(jiàn)的故障的解決方法。
waters液相色譜儀常見(jiàn)問(wèn)題的有以下幾種:
(1)在更換零件時(shí)選擇的型號(hào)有誤,接口不是很匹配,在擰緊的時(shí)候產(chǎn)生變形而使得管路堵塞。
(2)樣品處理液凈化得不干凈,長(zhǎng)期會(huì)在六通閥和柱之間形成阻塞不暢。
(3)在使用手動(dòng)六通閥時(shí),有些人可能由于手勁小的原因,轉(zhuǎn)動(dòng)的不到位,于是造成流路形成了死堵,壓力快速升高超過(guò)警戒值。
(4)在使用金屬管路作出廢液管時(shí),應(yīng)當(dāng)注意廢液瓶中先放一些水,并把廢液管的出口端放在液面下。如果位于在液相上且實(shí)驗(yàn)使用較高濃度的緩沖鹽溶液,在停機(jī)時(shí)可能在出口端結(jié)晶成塊并造成堵塞。這種情況不常見(jiàn),但卻的確發(fā)生過(guò)。
(一)waters液相色譜儀保留時(shí)間變化
1.柱溫變化柱恒溫,必要時(shí)需配置恒溫箱
2.等度與梯度間未能充分平衡至少用10倍柱體積的流動(dòng)相平衡柱
3.緩沖液容量不夠用>25mmol/L的緩沖液
4.柱污染每天沖洗柱
5.柱內(nèi)條件變化穩(wěn)定進(jìn)樣條件,調(diào)節(jié)流動(dòng)相
6.柱快達(dá)到壽命采用保護(hù)柱
(二)液相色譜儀保留時(shí)間縮短
1.流速增加檢查泵,重新設(shè)定流速
2.樣品超載降低樣品量
3.鍵合相流失流動(dòng)相PH值保持在3~7.5檢查柱的方向
4.流動(dòng)相組成變化防止流動(dòng)相蒸發(fā)或沉淀
5.溫度增加柱恒溫
(三)液相色譜儀保留時(shí)間延長(zhǎng)
1.流速下降管路泄漏,更換泵密封圈,排除泵內(nèi)氣泡
2.硅膠柱上活性點(diǎn)變化用流動(dòng)相改性劑,如加三乙胺,或采用堿至鈍化柱
3.鍵合相流失同前(二)
4.流動(dòng)相組成變化同前(二)
5.溫度降低同前(二)
(四)waters液相色譜儀出現(xiàn)肩峰或分叉
1.樣品體積過(guò)大用流動(dòng)相配樣,總的樣品體積小于峰的15%
2.樣品溶劑過(guò)強(qiáng)采用較弱的樣品溶劑
3.柱塌陷或形成短路通道更換色譜柱,采用較弱腐蝕性條件
4.柱內(nèi)燒結(jié)不銹鋼失效更換燒結(jié)不銹鋼,加在線過(guò)濾器,過(guò)濾樣品
5.進(jìn)樣器損壞更換進(jìn)樣器轉(zhuǎn)子
(五)waters液相色譜儀鬼峰
1、進(jìn)樣閥殘余峰每次用后用強(qiáng)溶劑清洗閥,改進(jìn)閥和樣品的清洗
2、樣品中未知物處理樣品
3、柱未平衡重新平衡柱,用流動(dòng)相作樣品溶劑(尤其是離子對(duì)色譜)
4、(TFA)氧化(肽譜)每天新配,用抗氧化劑
5、水污染(反相)通過(guò)變化平衡時(shí)間檢查水質(zhì)量,