液相色譜儀是指利用混合物在液-固或不互溶的兩種液體之間分配比的差異,對(duì)混合物進(jìn)行先分離,而后分析鑒定的儀器。液相色譜是一類分離與分析技術(shù),其特點(diǎn)是以液體作為流動(dòng)相和固定相,又分為液-液色譜(LLC)及液-固色譜(LSC)。液相色譜儀由高壓輸液泵、進(jìn)樣系統(tǒng)、溫度控制系統(tǒng)、色譜柱、檢測(cè)器、信號(hào)記錄系統(tǒng)等部分組成。
液相色譜儀色譜柱在運(yùn)輸過程中或在沒有使用時(shí),它的兩端總是用堵頭進(jìn)行密封。當(dāng)將色譜柱接入色譜儀器系統(tǒng)時(shí),首先移去兩端的堵頭。請(qǐng)注意將流動(dòng)相流動(dòng)的方向與柱上標(biāo)記的方向保持一致。除非出于特殊考慮,例如為了清除堵在色譜柱入口端的臟污等而需要將色譜柱反接以進(jìn)行沖洗時(shí),建議用戶在接上色譜柱時(shí)一定要遵循柱上標(biāo)記的方向。
由于色譜柱的連接是整個(gè)色譜操作過程的一部分,如果密封卡套過緊,或安裝不合適,或者密封卡套與色譜柱端口不匹配,都有可能導(dǎo)致溶液的泄漏。請(qǐng)按照下面步驟將色譜柱與密封卡套相連接,從而將色譜柱接入液相色譜儀系統(tǒng):
①初次使用的管線,請(qǐng)依次將管線接頭和密封卡套裝在外徑1/16”的管線上。密封卡套的寬口端應(yīng)朝向管線接頭。
②將管線緊緊插入色譜柱的接口,向前滑動(dòng)密封卡套和管線接頭,并使管線接頭的螺紋與色譜柱端口的螺紋相互銜接,然后擰緊管線接頭。如果管線為高分子材料,請(qǐng)轉(zhuǎn)到步驟④;如果是金屬管線,請(qǐng)繼續(xù)③。
③在用力將管線壓入柱端接口之后,用1/4”扳手將已擰緊的螺帽再進(jìn)一步緊固。
④對(duì)液相色譜儀色譜柱的另一端采用上述方法進(jìn)行操作。C18色譜柱中的液相是甲醇(或乙腈)的水溶液。在儲(chǔ)存和運(yùn)輸過程中,硅膠填料可能會(huì)干涸。這時(shí)推薦使用10-20倍柱體積的純有機(jī)溶劑如甲醇、乙腈等進(jìn)行沖洗以活化色譜柱。接著可用自己選擇的流動(dòng)相沖洗色譜柱。流速由0.1mL/min逐漸升至所需的操作條件,直至基線穩(wěn)定為止。如果柱壓和基線波動(dòng)較大,這可能是氣泡進(jìn)入了色譜柱中。這時(shí)可用較高流速?zèng)_洗色譜柱2-5分鐘,例如4.6~150mm的色譜柱可采用流速2mL/min。